一、背景及摘要
自2008年来，丹麦、法国、瑞士等地的一些以饲养丹系猪为主的猪场相继发生了仔猪腹泻病，调查显示，在上述猪场中，无论是在发病还是在未发病的适龄猪（主要为一周龄以内仔猪）中，均能观察到一些常见的肠道致病病原、典型的剖检病变以及组织病理变化，说明这些腹泻病例，有别于传统的仔猪腹泻，并非由单一病原所致，目前将这类腹泻病例统称为新新生仔猪腹泻（New Neonatal Porcine Diarrhoea Syndrome，NNPDS）。为查明病因，本研究调查了4个管理完善的猪场中的989头仔猪，通过病例-对照的方法，借助分子生物学及血清学手段比较了发病仔猪和未发病仔猪间各类肠道病毒的检出差异，结果显示此类腹泻病例与流行性腹泻、传染性胃肠炎、轮状病毒、库布病毒及星状病毒等常见肠道病毒无必然联系。

二、样品采集
本研究选择了4个持续发生腹泻至少1年以上，生产管理比较完善的场进行调查研究。从上述场中每场选择3-7日龄发病和未发病仔猪各约15头左右，采集直肠拭子样品后将其安乐死，采集肠道组织样品进行后续检测。

三、检测方法及对象
通过反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）、实时荧光定量反转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）、实时荧光聚合酶链式反应（qPCR）、酶联免疫吸附实验（ELISA）等分子生物学以及免疫学方法检测了包括轮状病毒、冠状病毒（包括猪流行性腹泻病毒和传染性胃肠炎病毒）、诺如病毒、札如病毒、星状病毒（1-5型）、库布病毒、捷申病毒、圆环病毒2型在内的主要或可能的肠道致病病毒，同时也检测了可能的人源腹泻病毒如肠道病毒（enterovirus）、副肠孤病毒（parechovirus）、saffoldvirus、cosavirus以及klassevirus等。

四、结果
对46份发病猪样品和46份未发病猪样品的冠状病毒（包括PEDV和TGEV）检测结果显示均为阴性；对76份样品的轮状病毒A型检测结果显示只有7份为核酸阳性，并且7份阳性样品中还有1份来自未发病猪，同时检测的轮状病毒C型检测均为阴性；对47例发病猪和49例未发病猪样品的库布病毒检测结果显示，共96份样品中，库布病毒阳性88份，占91.7%，其中发病猪样品阳性率为93.6%而未发病猪样品阳性率为89.8%；而星状病毒检测结果显示，共72份样品为阳性，阳性率为75%，其中发病猪样品阳性率为70.2%，未发病猪样品阳性率为79.6%；捷申病毒和圆环病毒2型检测结果显示，96份样品中只有3份为捷申病毒阳性，而圆环病毒2型均为阴性，具体检测结果详见表1。

表1  检测结果统计

五、讨论
近年来，北美、亚洲甚至包括德国在内的一些欧洲国家都相继发生了猪流行性腹泻病疫情，使得国内很多养殖场对流行性腹泻都“谈虎色变”，场内一旦发生腹泻病情，往往都会归结于流行性腹泻、轮状病毒等主要肠道病毒，但事实上，腹泻病的病因复杂，除病毒性因素外，常见细菌的如大肠杆菌、沙门氏菌、产气荚膜梭菌、梭状芽孢杆菌以及某些寄生虫如等孢子球虫等均能引起腹泻。并且，腹泻病的发生与场内的生产管理方式如温度和通风控制、产房清洗消毒模式、仔猪的产后处理等都有关系。尤其是困扰养殖业的新生仔猪腹泻，学术界目前对其病因仍无定论，除去管理性因素外，越来越多的研究似乎更倾向于认为该病是多病原因素导致的肠道微环境失衡而引起腹泻，正如本研究所述的病例，并未检出流行性腹泻、轮状病毒等主要肠道病毒，虽然库布病毒和星状病毒的总体检出率分别为91.7%和75%，但库布病毒在发病猪和未发病猪中的检出率分别为93.6%和89.8%，而星状病毒在发病猪和未发病猪中的检出率分别为70.2%和79.6%，这两类腹泻病毒在发生腹泻和未发生腹泻的仔猪中检出率并无显著差异，说明与这两类病毒也无关联。

综上所述，虽然目前新生仔猪腹泻病因未明，致病原理还需进一步研究证实，但至少可以从本研究所获数据看出，新生仔猪腹泻与流行性腹泻、传染性胃肠炎、轮状病毒等常见肠道病毒并不存在必然联系。

本文摘自No evidence of enteric viral involvement in the new neonatal porcine diarrhoea syndrome in Danish pigs

作者N.B.Goecke, C.K.Hjulsager.,et al, 2017

译者 陈娟娟
单位 如皋市畜牧兽医站